光合色素

高中生物採用溶劑推進距離平方根規律和尺子直接測量Rf值的正常相色素分配示例

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關於此實驗

展開含有四種色素的葉片混合物,標記溶劑前沿,並直接在色譜圖上測量遷移距離。比較固定相、溶劑極性和上樣量,同時區分模型值與用尺子自行讀出的數值。

學習目標

  • 兩段距離都從原始樣品線開始測量。
  • 計算Rf,並將其與遷移距離區分開。
  • 解釋上樣量和溶劑條件會影響分離品質的原因。

使用方法

  1. 1展開起始混合物,停止展開並標記溶劑前沿。
  2. 2選擇一種色素,拖動兩個尺柄來測量其Rf。
  3. 3在繼續展開或更換混合物之前記錄結果。
  4. 4比較極性更強的溶劑、另一種固定相和更大的上樣量。

模型

兩段距離都以同一個樣品原點為基準。
所示的分配係數決定了用於說明的遷移比例。

假設

  • 四種具名色素的示例參考 Rf 值分別為 0.95、0.65、0.50 和 0.35。它們不是通用的鑑定標準,也不是針對某種指定溶劑測得的常數。
  • 正相分配規則指出,溶劑極性越高,保留越弱。使用另一種吸附劑板時,保留係數乘以 1.4。
  • 溶劑前緣按時間的平方根推進,並在 80 mm 處停止。所有色帶中心都保持在前緣之後。顯示的類高斯色帶會隨時間和上樣量增加而變寬。
  • 尺量距離是可編輯的測量值,與模型分配值不同。比值大於 1 時會提示檢查位置。
  • 更改展開時間會清除目前的尺量標記。測量筆記本中的記錄保持不變。從混合物中移除的色素沒有可供測量的色帶。

在課堂上試試這個實驗

  1. Q1為什麼必須從原點而不是從某種色素開始測量溶劑前緣的距離?
  2. Q2色帶變寬後,為什麼更難測量其中心?

常見問題

初始 Rf 值能否用來識別實際溶劑中的色素?

不能。Rf 值取決於溶劑和固定相。參考值明確僅供說明之用。

為什麼我測得的 Rf 值會與模型 Rf 值不同?

尺子的把手刻意設計為彼此獨立的測量工具。把手的位置可能會造成測量誤差。