光合成色素

高等学校生物溶媒の進行距離の平方根則と定規による直接的なRf測定を用いた、通常相における色素分配の例

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この実験について

4種類の色素を含む葉の混合物を展開し、溶媒前線に印を付け、クロマトグラム上で移動距離を直接測定します。固定相、溶媒の極性、試料の添加量を比較し、モデル値と自分で定規から読み取った値を区別します。

学習目標

  • 元の試料線から両方の距離を測定します。
  • Rfを計算し、移動距離と区別します。
  • 試料の添加量と溶媒条件が分離の質に影響する理由を説明します。

使い方

  1. 1開始時の混合物を展開し、展開を止めて溶媒前線に印を付けます。
  2. 2色素を1つ選び、2つの定規ハンドルをドラッグしてRfを測定します。
  3. 3展開を再開するか混合物を変更する前に、結果を記録します。
  4. 4より極性の高い溶媒、別の固定相、より多い試料添加量を比較します。

モデル

どちらの距離も同じ試料原点から測ります。
示された分配係数によって、説明用の移動割合が決まります。

前提条件

  • 4種類の名称付き色素には、説明用の参考Rf値として0.95、0.65、0.50、0.35が設定されています。これらは、普遍的な同定基準でも、特定の溶媒で測定された定数でもありません。
  • 順相分配の規則では、溶媒の極性が高いほど保持が弱くなります。別の吸着剤プレートでは、保持係数に1.4を掛けます。
  • 溶媒前線は時間の平方根に比例して進み、80 mmで止まります。すべてのバンドの中心は前線より後方にとどまります。表示されるガウス状のバンドは、時間の経過や試料量の増加に伴って幅が広がります。
  • 定規で測る距離は編集可能な測定値であり、モデルの分配値とは異なります。比が1を超えた場合は、配置を確認してください。
  • 展開時間を変更すると、現在の定規の目盛りは消去されます。測定ノートの記録は固定されたままです。混合物から取り除かれた色素には、測定できるバンドがありません。

授業で試してみましょう

  1. Q1溶媒前線までの距離は、なぜ色素ではなく原点から測る必要があるのですか?
  2. Q2バンドの幅が広がると、なぜ中心を測りにくくなるのですか?

よくある質問

初期のRf値から、実際の溶媒で色素を特定できますか?

いいえ。Rf値は溶媒と固定相によって異なります。基準値はあくまで説明用です。

測定したRf値がモデルのRf値と異なるのはなぜですか?

定規のハンドルは、意図的に互いに独立した測定ツールとして設計されています。配置によって測定誤差が生じることがあります。