光合色素

高中生物采用溶剂推进距离平方根规律和尺子直接测量Rf值的正常相色素分配示例

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关于此实验

展开含有四种色素的叶片混合物,标记溶剂前沿,并直接在色谱图上测量迁移距离。比较固定相、溶剂极性和上样量,同时区分模型值与用尺子自行读出的数值。

学习目标

  • 两段距离都从原始样品线开始测量。
  • 计算Rf,并将其与迁移距离区分开。
  • 解释上样量和溶剂条件会影响分离质量的原因。

使用方法

  1. 1展开起始混合物,停止展开并标记溶剂前沿。
  2. 2选择一种色素,拖动两个尺柄来测量其Rf。
  3. 3在继续展开或更换混合物之前记录结果。
  4. 4比较极性更强的溶剂、另一种固定相和更大的上样量。

模型

两段距离都以同一个样品原点为基准。
所给出的分配系数决定了用于说明的迁移比例。

假设

  • 四种具名色素的示例参考 Rf 值分别为 0.95、0.65、0.50 和 0.35。它们不是通用的鉴定标准,也不是针对某种指定溶剂测得的常数。
  • 正相分配规则表明,溶剂极性越高,保留越弱。使用另一种吸附剂板时,保留系数乘以 1.4。
  • 溶剂前沿按时间的平方根推进,并在 80 mm 处停止。所有色带中心都保持在前沿之后。显示的类高斯色带会随时间和上样量增加而变宽。
  • 尺量距离是可编辑的测量值,与模型分配值不同。比值大于 1 时会提示检查位置。
  • 更改展开时间会清除当前的尺量标记。测量记录本中的记录保持不变。从混合物中移除的色素没有可供测量的色带。

在课堂上试试这个实验

  1. Q1为什么必须从原点而不是从某种色素开始测量溶剂前沿的距离?
  2. Q2色带变宽后,为什么更难测量其中心?

常见问题

初始 Rf 值能否用于识别实际溶剂中的色素?

不能。Rf 值取决于溶剂和固定相。参考值明确仅用于说明。

为什么我测得的 Rf 值会与模型 Rf 值不同?

尺子的手柄被特意设计为彼此独立的测量工具。手柄的位置可能会引入测量误差。