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Pigmentos fotosintéticos

Educación secundaria superiorBiologíaRepresentación ilustrativa de la partición de pigmentos en fase normal con avance del disolvente proporcional a la raíz cuadrada y mediciones directas de Rf con una regla

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Acerca de este experimento

Desarrolla una mezcla de cuatro pigmentos de hoja, marca el frente del disolvente y mide directamente las distancias de migración en el cromatograma. Compara las fases estacionarias, la polaridad del disolvente y la cantidad de muestra aplicada, y distingue los valores del modelo de tus propias lecturas con la regla.

Objetivos de aprendizaje

  • Mide ambas distancias desde la línea de muestra original.
  • Calcula el Rf y distínguelo de la distancia recorrida.
  • Explica por qué la cantidad de muestra aplicada y las condiciones del disolvente afectan a la calidad de la separación.

Cómo usarlo

  1. 1Desarrolla la mezcla inicial, detén el proceso y marca el frente del disolvente.
  2. 2Selecciona un pigmento y arrastra los dos controles de la regla para medir su Rf.
  3. 3Registra el resultado antes de reanudar el desarrollo o cambiar la mezcla.
  4. 4Compara un disolvente más polar, otra fase estacionaria y una mayor cantidad de muestra aplicada.

El modelo

Ambas distancias se miden desde el mismo origen de la muestra.
El coeficiente de partición indicado controla la fracción de migración ilustrativa.

Supuestos

  • Cuatro pigmentos identificados tienen valores Rf de referencia ilustrativos de 0,95, 0,65, 0,50 y 0,35. No son estándares universales de identificación ni constantes medidas para un disolvente determinado.
  • En una partición de fase normal, una mayor polaridad del disolvente reduce la retención. La placa adsorbente alternativa multiplica los coeficientes de retención por 1,4.
  • El frente del disolvente avanza en proporción a la raíz cuadrada del tiempo y se detiene en 80 mm. El centro de cada banda permanece detrás de ese frente; las bandas representadas, de forma aproximadamente gaussiana, se ensanchan con el tiempo de desarrollo y la carga.
  • Las distancias medidas con la regla son mediciones editables, distintas de los valores de partición del modelo. Los cocientes superiores a uno indican que debe comprobarse la colocación.
  • Cambiar el tiempo de desarrollo borra las marcas actuales de la regla. Los registros del cuaderno de mediciones permanecen sin cambios. Un pigmento retirado de la mezcla no tiene ninguna banda que se pueda medir.

Pruébalo en clase

  1. Q1¿Por qué debe medirse la distancia del frente del disolvente desde el origen y no desde un pigmento?
  2. Q2¿Por qué es más difícil medir el centro de una banda ensanchada?

Preguntas frecuentes

¿Pueden los valores de Rf iniciales identificar pigmentos en algún disolvente real?

No. El Rf depende del disolvente y de la fase estacionaria. Los valores de referencia son explícitamente ilustrativos.

¿Por qué puede diferir mi Rf medido del Rf del modelo?

Los controles de la regla son intencionadamente herramientas de medición independientes. Su colocación puede introducir errores de medición.