Pigments photosynthétiques

LycéeBiologieIllustration de la répartition des pigments en chromatographie en phase normale, avec une progression du solvant proportionnelle à la racine carrée et des mesures directes du Rf à l’aide d’une règle

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À propos de cette expérience

Développez un mélange de quatre pigments foliaires, marquez le front du solvant et mesurez directement les distances de migration sur le chromatogramme. Comparez les phases stationnaires, la polarité du solvant et la quantité déposée, tout en distinguant les valeurs du modèle de vos propres mesures à la règle.

Objectifs pédagogiques

  • Mesurez les deux distances à partir de la ligne d’échantillon initiale.
  • Calculez le Rf et distinguez-le de la distance parcourue.
  • Expliquez pourquoi la quantité déposée et les conditions du solvant influencent la qualité de la séparation.

Comment l’utiliser

  1. 1Développez le mélange initial, arrêtez le développement et marquez le front du solvant.
  2. 2Sélectionnez un pigment et faites glisser les deux poignées de la règle pour mesurer son Rf.
  3. 3Enregistrez le résultat avant de reprendre le développement ou de modifier le mélange.
  4. 4Comparez un solvant plus polaire, une autre phase stationnaire et une quantité d’échantillon déposée plus importante.

Le modèle

Les deux distances sont mesurées à partir de la même origine de l’échantillon.
Le coefficient de partage indiqué contrôle la fraction de migration illustrative.

Hypothèses

  • Quatre pigments nommément désignés ont des valeurs Rf de référence indicatives de 0,95, 0,65, 0,50 et 0,35. Il ne s’agit ni de normes universelles d’identification ni de constantes mesurées pour un solvant donné.
  • En partage en phase normale, une polarité plus élevée du solvant entraîne une rétention plus faible. La plaque adsorbante alternative multiplie les coefficients de rétention par 1,4.
  • Le front du solvant avance proportionnellement à la racine carrée du temps et s’arrête à 80 mm. Le centre de chaque bande reste en retrait par rapport à ce front ; les bandes affichées, de forme approximativement gaussienne, s’élargissent avec le temps de développement et la charge.
  • Les distances mesurées à la règle sont des mesures modifiables, distinctes des valeurs de partage du modèle. Les rapports supérieurs à un incitent à vérifier le positionnement.
  • La modification du temps de développement efface les marques actuelles de la règle. Les entrées du carnet de mesures restent inchangées. Un pigment retiré du mélange n’a aucune bande à mesurer.

À essayer en classe

  1. Q1Pourquoi faut-il mesurer la distance du front du solvant depuis l’origine plutôt que depuis un pigment ?
  2. Q2Pourquoi le centre d’une bande élargie est-il plus difficile à mesurer ?

Foire aux questions

Les valeurs de Rf initiales peuvent-elles identifier des pigments dans un solvant réel quelconque ?

Non. Le Rf dépend du solvant et de la phase stationnaire. Les valeurs de référence sont explicitement fournies à titre illustratif.

Pourquoi mon Rf mesuré peut-il différer du Rf du modèle ?

Les poignées de la règle sont intentionnellement des outils de mesure indépendants. Leur positionnement peut introduire une erreur de mesure.