使用顯微鏡

國中生物合成明視野標本影像,包含依據物鏡計算的視野直徑、根據數值孔徑估計的解析度,以及用於示意的失焦效果

轉動橘色調焦旋鈕並切換物鏡。使用載物台控制器移動載玻片。

3D

拖曳裝置進行調整。拖曳背景進行旋轉。捲動以縮放。

合成顯微鏡標本

40× · 4500 µm

測量記錄本

變更設定、測試預測並儲存結果。最多保留 12 個快照。

關於此實驗

觀察合成目鏡影像的同時,操作三維顯微鏡。切換物鏡、移動標本並重新對焦,了解儀器操作與所觀察視野之間的關係。比較總放大倍率、解析度和景深,不要以為影像越大就一定能看到更多細節。

學習目標

  • 了解物鏡和目鏡倍率與總放大倍率之間的關係。
  • 比較數值孔徑變化時的視野直徑、解析度和景深。
  • 使用比例尺判讀標本大小,並認識合成影像的限制。

使用方法

  1. 1從 4× 物鏡開始,找到細胞壁,並水平及垂直移動載玻片。
  2. 2切換至 40×,先將焦點移離樣本平面,再重新對焦。
  3. 3縮小孔徑,並比較解析度和景深的估算值。
  4. 4保持物鏡不變,改變目鏡倍率,記錄光學測量值並儲存一個視野。

模型

總放大倍率
解析度與近似景深

假設

  • 此樣本是對洋蔥或葉片表皮進行確定性繪製的圖像,不是照片,也不是診斷樣本。模糊和亮度僅供示意。
  • 視野直徑等於 18 mm 除以物鏡倍率。所有目鏡均設定為相同的 18 mm 視野數。波長固定為 0.55 µm。
  • 解析度以 0.61 倍波長除以數值孔徑估算;景深以波長除以孔徑平方計算。不考慮像差、浸液介質、光學切片及定量成像。

在課堂上試試這個實驗

  1. Q1為什麼使用更高倍率的目鏡不會提高以物鏡為基礎的解析度估算值?
  2. Q2為什麼縮小光圈會降低解析度,卻可能讓失焦的標本看起來更清晰?

常見問題

這張影像適合用來辨識真實組織嗎?

不適合。這是用於教學的合成標本,其結構經過刻意簡化。

為什麼目鏡倍率會改變放大倍率,卻不會改變顯示的視野直徑?

此模型固定了目鏡視野數。在此假設下,標本視野直徑僅取決於物鏡倍率。