關於此實驗
觀察合成目鏡影像的同時,操作三維顯微鏡。切換物鏡、移動標本並重新對焦,了解儀器操作與所觀察視野之間的關係。比較總放大倍率、解析度和景深,不要以為影像越大就一定能看到更多細節。
學習目標
- 了解物鏡和目鏡倍率與總放大倍率之間的關係。
- 比較數值孔徑變化時的視野直徑、解析度和景深。
- 使用比例尺判讀標本大小,並認識合成影像的限制。
使用方法
- 1從 4× 物鏡開始,找到細胞壁,並水平及垂直移動載玻片。
- 2切換至 40×,先將焦點移離樣本平面,再重新對焦。
- 3縮小孔徑,並比較解析度和景深的估算值。
- 4保持物鏡不變,改變目鏡倍率,記錄光學測量值並儲存一個視野。
模型
假設
- 此樣本是對洋蔥或葉片表皮進行確定性繪製的圖像,不是照片,也不是診斷樣本。模糊和亮度僅供示意。
- 視野直徑等於 18 mm 除以物鏡倍率。所有目鏡均設定為相同的 18 mm 視野數。波長固定為 0.55 µm。
- 解析度以 0.61 倍波長除以數值孔徑估算;景深以波長除以孔徑平方計算。不考慮像差、浸液介質、光學切片及定量成像。
在課堂上試試這個實驗
- Q1為什麼使用更高倍率的目鏡不會提高以物鏡為基礎的解析度估算值?
- Q2為什麼縮小光圈會降低解析度,卻可能讓失焦的標本看起來更清晰?
常見問題
這張影像適合用來辨識真實組織嗎?
不適合。這是用於教學的合成標本,其結構經過刻意簡化。
為什麼目鏡倍率會改變放大倍率,卻不會改變顯示的視野直徑?
此模型固定了目鏡視野數。在此假設下,標本視野直徑僅取決於物鏡倍率。